抗體 (antibody, Ab)
1、抗體的概念:
? 機(jī)體受到抗原刺激后,由漿細(xì)胞合成并分泌出一類具有與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白,被稱為抗體。
– 主要存在于血清內(nèi);
– 都是免疫球蛋白,但免疫球蛋白并不一定都是。
– 免疫球蛋白根據(jù)重鏈的結(jié)構(gòu)及抗原特異性不同分為五種,既IgG、 IgD、IgE、 IgA、IgM。
2、免疫組化實驗中常用的:單克隆和多克隆。
? 單克隆:是一個B淋巴細(xì)胞克隆分泌的,是應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備的。
– 特異性強(qiáng)、產(chǎn)量高。
? 多克隆:是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的混合物。
– 特異性低,會產(chǎn)生的交叉反應(yīng)。
– 多克隆廣泛應(yīng)用于石蠟包埋組織切片,可減少假陰性染色機(jī)會。
– 抗原與的結(jié)合,要求量保持一定比例,當(dāng)抗原或過量時,是不能聚合成大顆粒。
3、的制備——多克隆的制備
? 動物的選擇
? 佐劑(adjuvant)
? 免疫方法
? 免疫劑量
? 效價的測定
? 放血或定期抽血